全自动生化分析仪常见问题及解决方案(一)
发布日期:2015-07-07 14:58:34
1、优质的仪器用水
优质的仪器用水是使用好检验试剂的一个十分重要环节之一。因为测定离子类的项目:比如铜、铁、锌、钙、镁、磷。
这些项目在使用过程中,仪器用水的质量相当重要,虽然现在一般医院的生化仪都带有制水系统,但制水系统基本都是制备去离子水,离子交换树脂在使用一段时间后交换能力明显下降,需要定期进行更换,否则制备的水离子含量多,电导率偏高。使用含离子超标的水冲洗仪器,直接影响检验结果。再如血氨、二氧化碳项目,如果水质不好,仪器用水中本身含氨和二氧化碳就很高,则检测该项目的结果也会受到严重的影响。还有如果血清中含有GLDH,而仪器用水存在氨时,可消耗NADH,使利用NADH的酶联连续监测法结果偏高。解决办法:定期监测水质,当仪器用水的电阻小于1.0MQ时要更换离子交换树脂或活性炭。
2、标本的及时分离及测定
标本的及时分离及测定是用好检验试剂的首要环节因为凡是利用NADH转化为NAD 变化率来检测其物质含量的试验都或多或少受到血液存放时间的影响。原因是全血存放时间越长,红细胞利用血清中的糖进行无氧酵解产生丙酮酸,丙酮酸使NADH转化为NAD ,这样使测定结果假性升高。解决办法:①作好与临床的沟通,对抽血人员和标本运送人员(传递人员)进行培训;② 及时分离血清并及时检测;③ 也可将全自动生化分析仪上的延迟时间设置大于60秒,这样试剂在延迟期内消除丙酮酸的干扰,可完全避免假阳性结果的出现。
3、交叉污染
3.1 生化分析仪本身的清洗问题造成的交叉污染在使用
全自动生化分析仪时,仪器的交叉污染现象是引起实验结果偏离的一个原因。由于全自动生化分析仪试剂针需要接触各种试剂,一般难以彻底清洗干净,所以容易造成分析项目的携带污染.而生化项目的测定往往仅需要几微升样本,试剂往往需要几百微升,尤其在没有自动冲洗程序的流动池式生化分析仪上,由于前带现象的存在,如果前一个样本为高值样本,则接后的第一个低值标本结果应慎重报告。不仅没有冲洗程序的生化分析仪器上有这种现象,就是具有自动冲洗程序的全自动生化分析仪也有交叉污染,例如Beckman全自动生化分析仪CX4,它的试剂吸针(Probe)、样品吸针及反应搅拌棒是利用高压冲洗液冲洗,然后用高压压缩空气吹干,有时由于洗液压力和压缩空气的压力偏低,使试剂吸针、样品吸针及反应混匀棒冲不干净、吹不干,从而导致反应池之问相互污染、试剂问交又污染,使检验结果偏离。另一个值得注意的问题是许多生化仪器由于长期频繁的利用,使加样针和试剂针的注射器磨损加重或注射器的“特氟龙”吸头不及时更换,使吸样针或试剂针密封层增大,产生泄漏现象也是造成样本间及试剂间相互污染的一个重要原因。试剂吸样或样品吸样不准确,通常导致利用速率法测试的标本系统偏低或偏高。众所周知,速率法计算因子是由加样体积和试剂体积参与确定的,如果加样体积或加试剂体积不准,导致真正速率计算因子和理论计算因子偏离,从而使检测结果不准确。解决办法:①定期进行仪器维护保养;②按要求及时更换零部件;③定期对仪器进行校准;④全自动生化分析标本和试剂用量少,残存少量即会影响测试结果,每天应用无水乙醇擦洗并定期更换干燥棒,保证比色杯清洗后不留残液,避免比色杯的交叉污染。
3.2 检验项目间的交叉污染
在全自动生化分析仪的使用中,我们发现一个项目会影响紧随其后项目的测试结果,造成这种影响的原因之一是一种试剂中含有另一试验的测定物质而直接干扰其测试结果。原因之二是一种试剂中含有改变另一试验反应条件或影响其反应进程的物质而间接干扰其测试结果。比如:在TP试剂中含有大量的CuSO4,如果将Cu放在TP项目的后面检测,会使检测结果偏高或重复性差。再如P放在含有磷酸盐的项目后面,TBA放在含有胆酸盐的项目后面都会使检测结果偏高或重复性差。GLU放在CK和CK-MB的项目后面可能会使检测结果偏高或重复性差。LDH放在ALT和AST的项目后面可能会使检测结果偏高或重复性差。Mg放在ALP等含有镁离子项目后面可能会使检测结果偏高或重复性差。Ca放在Amy项目后面可能会使检测结果偏高或重复性差。Mg试剂(CALMAGITE法)中含有EGTA,会干扰Ca的测定结果。另外我们发现相邻两个项目的PH值相差太大或反应对PH要求严格的项目,也会对测定的结果产生影响,比如TP和Alb之间PH相差较大,会互相干扰,TBA放在Alb后面测定,会使测定结果偏低等等。解决办法:①调整实验的前后顺序来消除这种影响;②在造成污染的项目和受污染的项目之间设置清洗剂并设定进行清洗的次数。